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關于真核蛋白表達系統(tǒng)您了解多少?

發(fā)表時間:2024-04-22 訪問次數(shù):1051

  真核蛋白表達技術是是一種在生物藥品制備以及生物研究領域有著廣泛使用的蛋白技術,通過將外源基因轉染之真核細胞中,使得目標蛋白得以表達。相比原核表達系統(tǒng)來說,真核蛋白表達系統(tǒng)能夠更好地進行折疊以及翻譯后修飾工作,更適合于表達那些功能性更強的蛋白。

關于真核蛋白表達系統(tǒng)您了解多少?

  真核蛋白表達的原理:

  真核蛋白表達的原理是通過技術手段將外源基因導入到真核細胞內(nèi),利用宿主細胞的生物機制合成目標蛋白的過程。通過基因克隆、轉染、轉錄后翻譯、翻譯后修飾、蛋白純化、蛋白分析等一系列的手段來實現(xiàn)蛋白表達;

  真核蛋白表達的流程:

  1、基因克隆。將目標基因克隆到真核表達載體中,當然了,根據(jù)需求進行啟動子、標記以及調(diào)控元件等元件的選擇;

  2、細胞培養(yǎng)。將所得載體轉染到真核細胞中,而后再通過細胞培養(yǎng),使得其具備蛋白表達的能力;

  3、細胞篩選。從所得細胞中篩選出能夠正常表達目標蛋白的細胞,并通過細胞裂解來獲得目的蛋白;

  4、蛋白純化。通過層析、透析、離心、沉淀等一系列的手段提升目的蛋白的純度;

  常用的真核蛋白表達方法:

  1、哺乳動物表達系統(tǒng)。采用哺乳動物細胞為載體表達蛋白,適合大規(guī)模表達復雜蛋白;

  2、昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)。采用桿狀病毒攜帶目的基因轉染昆蟲細胞的方式來表達蛋白,適合一些較為簡單的真核蛋白表達,具備制備成本低、操作簡單等方式;

  3、酵母表達系統(tǒng)。采用酵母細菌表達目標蛋白的方式,適合于表達一些中等規(guī)模的蛋白,對于那些較大規(guī)模以及高密度表達的蛋白;

  綜上所述,我們需要結合蛋白的性質和需求來選擇合適的蛋白表達系統(tǒng),通過對培養(yǎng)條件、轉染條件等方式來提升蛋白的表達效率。當然了,我們在進行蛋白表達過程中,需要選擇合適的蛋白純化方法,避免對蛋白造成影響。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供真核蛋白表達服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。