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盤(pán)點(diǎn)兔單克隆抗體制備過(guò)程中的一些常見(jiàn)問(wèn)題及其解決辦法

發(fā)表時(shí)間:2024-01-11 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):856

  在兔單克隆抗體制備的過(guò)程中,常常會(huì)因?yàn)檫@樣或那樣的原因?qū)е聦?shí)驗(yàn)的失敗,很多時(shí)候是一些細(xì)節(jié)操作方面的問(wèn)題導(dǎo)致,其他則是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面的問(wèn)題。有鑒于此,普健生物在這里和大家盤(pán)點(diǎn)有關(guān)兔單克隆抗體制備過(guò)程中的一些常見(jiàn)問(wèn)題及其解決辦法。

  1、抗體產(chǎn)量低

  這也是抗體制備中最常見(jiàn)的一個(gè)問(wèn)題,導(dǎo)致這個(gè)現(xiàn)象的原因也很多。可以通過(guò)提高抗原免疫方案、增加免疫次數(shù)或者通過(guò)使用強(qiáng)化佐劑的方式來(lái)提升其免疫反應(yīng);

  2、抗體特異性不足

  所得抗體的特異結(jié)合性較差,會(huì)和非目標(biāo)蛋白相結(jié)合。當(dāng)碰到這種情況時(shí),我們可以選擇重新選擇抗原,優(yōu)化抗原純度;

  3、抗體親和力不足

  一般來(lái)說(shuō),出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因是因?yàn)橥脝慰沟挠H和力不足導(dǎo)致??梢酝ㄟ^(guò)調(diào)整免疫方案、優(yōu)化抗原選擇以及優(yōu)化純化步驟等方式來(lái)提升抗體親和力;

  4、雜交瘤細(xì)胞融合率低

  可能是因?yàn)闇囟取h(huán)境等融合條件選擇不合適。我們可以通過(guò)優(yōu)化融合條件,結(jié)合細(xì)胞的特性,設(shè)置合適的融合環(huán)境,或者嘗試其他融合方法;

  5、抗體穩(wěn)定性差

  主要是因?yàn)閱慰寺〖?xì)胞缺乏穩(wěn)定性,從而導(dǎo)致抗體產(chǎn)量不穩(wěn)定。我們可以通過(guò)不定期測(cè)試細(xì)胞穩(wěn)定性來(lái)提升所得抗體的穩(wěn)定性,也可以通過(guò)選擇更加穩(wěn)定的單克隆抗體細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增來(lái)提升抗體的穩(wěn)定性;

  6、抗體受到污染

  主要原因是因?yàn)榧?xì)胞或抗原受到污染??梢酝ㄟ^(guò)適當(dāng)?shù)靥嵘兌葋?lái)解決;

  當(dāng)然了,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們需要做好相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)記錄,并記錄好詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟,以便于后期進(jìn)行相關(guān)查詢(xún)。在兔單克隆抗體制備的過(guò)程中,我們需要注意好相關(guān)細(xì)節(jié)問(wèn)題,做好相應(yīng)的優(yōu)化和調(diào)整策略,這樣,才能更好地保證抗體的制備。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供兔單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。