蛋白純化之前我們都需要優(yōu)先對其進行提取和分離，這樣能夠極大減少我們純化的過程，而且能讓純化的效果更好。那么，所謂的蛋白提取和分離是具體操作的呢?今天，普健生物就在這里和大家具體降解。

　　對于固態(tài)樣品材料我們采用先提取后分離的方式，對于微生物發(fā)酵或動植物細胞培養(yǎng)所得的懸浮液則會因為細胞內(nèi)和細胞外的情況而方法不同。

　　細胞內(nèi)：需要先破碎細胞，并且在細胞破碎的過程中加入蛋白抑制酶，以防止細胞內(nèi)蛋白的降解。同時盡量保持在低溫情況下操作;

　　細胞外：因為蛋白存在于懸浮液中，我們只需要對其進行離心、過濾等過程就能進行固液分離，去除其他顆粒物質(zhì);

　　為了保證提取出更多目的蛋白，并減少其活性確實，我們常常采用各種水溶液來輔助分離，通常在偏離蛋白等電點0.5ph單位以上時，能更大程度上提升蛋白的溶解度。

　　1、對于等電點在堿性范圍內(nèi)的蛋白，我們可以考慮加入稀酸;

　　2、對于等電點在酸性范圍內(nèi)的蛋白，可以用稀酸提取(這樣有助于提升蛋白在提取液中的溶解度);

　　當然了，在加入稀酸的過程中，我們也要注意提取液的PH值，一定要保證過期在蛋白穩(wěn)定的范圍內(nèi)。

　　在細胞破碎后進行的蛋白提取，因為大部分的目的蛋白在懸浮液中，為了減少損失，我們需要使用到力量的緩沖液。

　　對于動物組織來說，使用的緩沖液為動物組織的2-2.5倍;

　　對于植物細胞來說，只需要使用少量的緩沖液即可;

　　當然了，細節(jié)方面的操作也很多，而且在通過離心、沉淀等一系列的過程后，蛋白的純度有了一定的提升，但是還是達不到我們使用的要求。這個時候，我們就需要對蛋白進行進一步的純化工作，通過一系列的純化手段，才能得到適宜濃度的蛋白產(chǎn)品。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。