單克隆抗體制備的相關知識大家應該了解不少了,如果還不了解,自覺去將我們之前發(fā)的有關單克隆抗體制備的相關文章讀一遍。其實在之前我們也只是和大家簡單聊了聊有關單克隆抗體制備的常規(guī)步驟,從今天起,我們再和大家聊聊其中的一些詳細步驟。比如,今天我們就要和大家聊一些常用的免疫方案。
我們知道,免疫是單克隆抗體制備的第一步,它的成功與否直接制約著后面實驗是否要做下去。所以,選擇一個合適的免疫方案就顯得尤為重要了。我們常用的免疫方案主要有兩種:可溶性抗原和顆粒性抗原。
可溶性抗原(這個類型的抗原需要進行多次免疫才能成功):
初次免疫:將抗原蛋白用等體積的福氏完全佐劑進行乳化,達到滴水不化的程度即可。而后,將其注射到小鼠背部皮下組織中,四周后再進行二次免疫;
二次免疫:同樣的蛋白乳化后注入初次劑量的一半即可。這次需要在兩周后對小鼠進行采血,通過離心后測試血清效價,如果已經達到要求則代表免疫成功,如果達不到要求,則需要進行三次免疫;
三次免疫:和首次免疫同樣劑量的蛋白溶液,小鼠融合前3天進行加強免疫;
顆粒性抗原:
選擇細胞和完全佐劑混合,而后對小鼠進行皮下或腹腔注射,2-3周后進行重復注射,3-4天后取脾融合。挑選免疫反應較好的動物,二次免疫后再次取血檢測;
當然了,還可以選用脾內注射法或是體外培養(yǎng)法,具體情況結合自身的情況來進行選擇。
單克隆抗體制備的第一步就是免疫,免疫的過程中需要結合實際情況進行變通,盡量選擇那些身體強勁且無疾病的動物,這樣能在更大程度上保證免疫的成功。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供單克隆抗體制備服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。
本文網(wǎng)址:http://www.szfeichi.net/archive/621.html,轉載請標明出處,謝謝!